背景[1-3]
小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附（ELISA）的检测试剂盒。
将往预先包被小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)样品浓度。目前常用的细胞增殖标记物有4种，DNA聚合酶α（DNA polymeraseα），增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen，PCNA），Ki-67和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）。其中Brdu为组织细胞非内源性表达存在，应用相对较广。Brdu，也称为溴化去氧尿苷，一种合成的胸苷类似物，在S期可替代胸腺嘧啶核苷选择性结合到细胞DNA中。从而检测细胞DNA合成和标记细胞分裂，凋亡等行为。在遗传研究中Brdu可通过活体注射或细胞培养加载，然后使用抗Brdu的单克隆抗体进行特异性标记，ICC或IHC法染色法显示增殖细胞。另外，还能同时结合其它细胞标记物，双重染色，来判断增殖细胞的种类，增殖速度等，对研究细胞动力学有着重要意义。
应用[4][5]
用于几种常见环境因素对小鼠海马成体神经发生与学习记忆的影响研究
成体神经发生(adult neurogenesis)是指成年动物神经系统某些特定部位存在神经干细胞(neural stem cell),这些干细胞能终生不断地产生新的神经元和胶质细胞,新产生的神经元能发育分化成成熟的神经元并与其它已经存在的神经元形成突触联系,融入到原有的神经网络中。
在哺乳类动物中成体神经干细胞主要局限于中枢神经系统的两个部位,个是侧脑室壁的亚室带(subventricular zone,SVZ),从这里产生的神经元向嗅球和纹状体迁移,然后大部分分化成中间神经元。第二个是海马中的齿状回颗粒细胞下层(subgranular zone,SGZ),新产生的神经元整合到齿状回神经环路中。起初,科学家认为只有在胚胎发育阶段,才有神经干细胞的产生,但是现在研究表明,几乎所有哺乳动物存在成体神经发生。另外成体神经发生障碍与一些疾病相关,例如老年痴呆、学习记忆能力下降,抑郁症和精神分裂症等。运用BrdU(新生细胞标志物)活体注射、多重荧光免疫组织化学、激光共聚焦显微镜、Western blot、Morris水迷宫试验等先进的形态学、分子生物学和行为学技术方法,研究成体神经发生对大脑功能的影响。
参考文献
[1]Exposure to swainsonine impairs adult neurogenesis and spatial learning and memory[J].Jiutao Wang,Lingzhen Song,Qi Zhang,Wei Zhang,Lei An,Yamei Zhang,Dewen Tong,Baoyu Zhao,Shulin Chen,Shanting Zhao.Toxicology Letters.2015(1)
[2]Programming Hippocampal Neural Stem/Progenitor Cells into Oligodendrocytes Enhances Remyelination in the Adult Brain after Injury[J].Simon M.G.Braun,Gregor-Alexander Pilz,Raquel A.C.Machado,Jonathan Moss,Burkhard Becher,Nicolas Toni,Sebastian Jessberger.Cell Reports.2015(11)
[3]Abnormal Expression of Synaptophysin,SNAP-25,and Synaptotagmin 1 in the Hippocampus of Kainic Acid-Exposed Rats with Behavioral Deficits[J].Feng-Xia Zhang,Qin-Jian Sun,Xing-Yue Zheng,You-Ting Lin,Wei Shang,Ai-Hua Wang,Rui-Sheng Duan,Zhao-Fu Chi.Cellular and Molecular Neurobiology.2014(6)
[4]Acute exposure to lead acetate activates microglia and induces subsequent bystander neuronal death via caspase-3 activation[J].Kanhaiya Lal Kumawat,Deepak Kumar Kaushik,Praveen Goswami,Anirban Basu.Neurotoxicology.2014
[5]王久涛.几种常见环境因素对小鼠海马成体神经发生与学习记忆的影响[D].西北农林科技大学,2015.