背景[1-3]
庆大霉素检定培养基Ⅰ可用于嗜水气单胞菌的分离鉴定培养。庆大霉素为氨基糖苷类广谱抗生素，对各种革兰阴性细菌及革兰阳性细菌都有良好抗菌作用，对各种肠杆菌科细菌如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、肠杆菌属、沙雷菌属及铜绿假单胞菌等有良好抗菌作用。
奈瑟菌属和流感嗜血杆菌对该品中度敏感。对布鲁菌属、鼠疫杆菌、不动杆菌属、胎儿弯曲菌也有一定作用。
对葡萄球菌属（包括金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌）中甲氧西林敏感菌株的约80%有良好抗菌作用，但甲氧西林耐药株则对该品多数耐药。对链球菌属和肺炎链球菌的作用较差，肠球菌属则对该品大多耐药。
作用机制是与细菌核糖蛋白体亚单位上的特异性蛋白牢固结合，干扰核糖蛋白体功能，阻止蛋白质合成，并引起翻译信使核糖核酸(mRNA)上密码的错误而合成无功能蛋白质。
临床上用于金葡菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、克雷白杆菌、变形杆菌和其它敏感菌所引起的败血症、呼吸道感染、胆道感染、化脓性腹膜炎、颅内感染、尿路感染及菌痢等疾患。
应用[4][5]
用于鱼源嗜水气单胞菌aopB~-aopD~-aroA~-缺失株构建及其生物学特性研究
aopB-/aopD-缺失株的构建参照GenBank中嗜水气单胞菌aopB/aopD序列,从Ah2056基因组中扩增aopB/aopD上下游片断,连接到自杀性质粒pRE112上,构建了缺失369bp的aopB/aopD基因并含有蔗糖敏感基因（sacB）的重组自杀性质粒pREaopB/aopD。
重组自杀性质粒pREaopB/aopD转化大肠杆菌X7213,以大肠杆菌X7213阳性克隆为供体菌,与受体菌Ah2056进行接合转移,经涂布氯霉素（Cm）抗性平板并转印到含10%蔗糖的平皿,筛选出Cm抗性（CmR）蔗糖敏感（SucS）的接合子,并用PCR鉴定重组自杀性质粒已经整合到染色体中。
阳性接合子在不含NaCl的培养基中培养促使第二次同源重组。再涂布含10%蔗糖的平皿,并转印到Cm平板上,筛选出Cm敏感（CmS）蔗糖抗性（SucR）的克隆,并用PCR鉴定第二次交换,从而构建aopB-/aopD-缺失株。
aopB-/aopD-/aroA-缺失株的构建参照GenBank中嗜水气单胞菌aroA序列,从Ah2056基因组中扩增aroA上下游片断,连接到自杀性质粒pSUP202上,构建缺失1290bp的aroA基因并含有庆大霉素抗性基因（aacC1）的重组自杀性质粒pSUParoA。
重组自杀性质粒pSUParoA转化大肠杆菌S17-1,以大肠杆菌S17-1阳性克隆为供体菌,与受体菌aopB-/aopD-缺失株进行接合转移,经涂布庆大霉素（Gm）和氯霉素（Cm）抗性平板,筛选Gm抗性（GmR）Cm抗性（cmR）的接合子,阳性接合子在不含NaCl的培养基中培养促使第二次同源重组。
再经涂布Gm的平板,并转印Cm到平板上进行筛选,筛出Cm敏感（CmS）Gm抗性（GmR）的克隆用PCR进行鉴定,确定发生第二次交换,从而构建aopB-/aopD-/aroA-缺失株。
参考文献
[1]The auxotrophic aroA mutant of Aeromonas hydrophila as alive attenuated vaccine against A.salmonicida infections inrainbow trout(Oncorhynchus mykiss).Jose Vivas,Jorge Riańo,Begońa Carracedo,Blanca E Razquin,Pilar López-Fierro,Germàn Naharro,Alberto J Villena.Fish and ShellfishImmunology.2004
[2]Transduction-mediated transfer of unmarked deletion and point mutations through use of counterselectable suicide vectors.Ho Y K,Charles M D,Steven A T,Tae H L,and Roy Curtiss III.Journal of Bacteriology.2002
[3]Update on the genus Aeromonas.Joseph S.W,Carnahan A.M.ASM News.2000
[4]High osmolarity improves the electro-transformation efficient of the gram-positive bacteria Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis.Gong-Ping Xue,Jennifer S Johnson,Brian P.Dalrymple.Journal of Microbiological Methods.1999
[5]罗晓松.鱼源嗜水气单胞菌aopB~-aopD~-aroA~-缺失株构建及其生物学特性研究[D].华中农业大学,2008.