背景[1-3]
沙氏琼脂培养基用于黑曲霉及白念珠菌的分离培养的分离培养（GB/T 16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法）。配方(每升)：蛋白胨10g；葡萄糖40g；琼脂15g；氯霉素0.1g；最终pH 6.0±0.2。
检验原理
酪蛋白胰酶消化物、动物组织的胃酶消化物提供氮源；葡萄糖提供碳源；琼脂是培养基的凝固剂。
用法称取本品65.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至60℃时,倾入无菌平皿,备用。
使用方法：
1、称取本品65.1g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min，备用。
2、取样液接种5个平皿，每个平皿中加入1mL，然后加入15 mL左右已溶化并保温至45℃左右的培养基，摇匀，凝固后，置25±2℃培养7d。
3、分别于3、5、7天观察结果，计算平板上的菌落数，并求平均值。
白念珠菌是一种腐物寄生菌，平时生存于人体的皮肤、粘膜、消化道及其他脏器中，当机体抵抗力降低时，白色念珠菌就会繁殖，达到一定量时，人体就会发病，所以白念珠菌是一种条件致病菌。
应用[4][5]
用于ZafA基因沉默对烟曲霉菌生长、毒力的影响研究
通过RNA干扰技术,探讨ZafA基因在烟曲霉菌生长、毒力中的重要性,为肺曲霉病新的治疗方法提供理论依据。
方法用化学合成法合成siRNA,通过电转染技术将siRNA转入烟曲霉菌孢子,提取总mRNA,进行RT-PCR,观察ZafA基因mRNA表达变化。将经过不同处理的烟曲霉菌孢子通过鼻内接种于麻醉后的免疫力低下小鼠,通过G试验、观察小鼠死亡率、肺部病理改变等,了解曲霉菌在体内的生长、毒力情况,并将肺组织于沙氏琼脂培养基中培养,确定其感染的特异性及真菌的生长情况。
结果（1）电转染后,siRNA干预组烟曲霉菌ZafA基因mRNA表达水平与18srRNA内参的比值为0.533±0.026,较错义链对照组1.098±0.027和PBS对照组1.082±0.012明显降低（P＜0.05）;
（2）转染后siRNA干预组烟曲霉菌在沙氏琼脂培养基上生长较错义链对照组及PBS对照组明显受限（P<0.05）;
（3）小鼠免疫指标:IgG造模前后分别为0.69±0.04、0.33±0.07;IgA 0.71±0.05、0.51±0.06;IgM 1.41±0.08、1.04±0.10（P＜0.05）;
（4）G试验检测（1-3）-β-D葡聚糖的含量,ZafA基因siRNA干预组较其余两对照组明显降低（P＜0.05）;
（5）体内实验显示siRNA干预组死亡2只,死亡率为6.3%,错义链对照组死亡16只,死亡率为53.3%,PBS对照组死亡15只,死亡率为50%。
肺部病理切片显示siRNA干预组肺部损伤较错义链对照组及PBS对照组明显减轻。生存分析提示siRNA干预组小鼠的生存时间较错义链对照组及PBS对照组明显延长。肺组织沙氏琼脂培养基培养示siRNA干预组未见真菌生长,错义链对照组及PBS对照组均有烟曲霉菌生长。
参考文献
[1]Basiliximab as an Alternative to Antithymocyte Globulin for Early Immunosuppression in Lung Transplantation[J].F.Clinckart,P.Bulpa,J.Jamart,P.Eucher,L.Delaunois,P.Evrard.Transplantation Proceedings.2009(2)
[2]Incidence of invasive aspergillosis following hematopoietic stem cell and solid organ transplantation:interim results of a prospective multicenter surveillance program[J].J.Morgan,K.A.Wannemuehler,K.A.Marr,S.Hadley,D.P.Kontoyiannis,T.J.Walsh,S.K.Fridkin,P.G.Pappas,D.W.Warnock.Medical Mycology.2005(S1)
[3]Pathophysiology of pulmonary aspergillosis[J].Kazutoshi Shibuya,Tsunehiro Ando,Chikako Hasegawa,Megumi Wakayama,Shigeharu Hamatani,Tsutomu Hatori,Tadashi Nagayama,Hiroko Nonaka.Journal of Infection and Chemotherapy.2004(3)
[4]Novel strategies in antifungal lead discovery[J].Bo Jiang,Howard Bussey,Terry Roemer.Current Opinion in Microbiology.2002(5)
[5]符少平.ZafA基因沉默对烟曲霉菌生长、毒力的影响[D].暨南大学,2009.