背景及概述[1]
Changliver/人张氏肝细胞为1954年从非恶性的人体组织中建立。广泛应用于病毒学、生化和恶性肿瘤相关的转移研究。Changliver/人张氏肝细胞ATCC通过同工酶分析、HeLA标记染色体和DNA指纹法分析,认为它的起源是HeLa细胞污染的。Changliver/人张氏肝细胞操作说明:
1)对于常温运输的细胞,收到细胞后,检查是否有运输问题,即细胞培养瓶或管是否破损,细胞培养液是否溢出。若没有运输问题,请75%酒精消毒后,保留封口膜,放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数:温度,湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后,细胞状态稳定后,即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系,Changliver/人张氏肝细胞严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许,培养的前三天内做细胞拍照记录。
2)对于干冰运输的细胞,请取出冷冻管后,须立即放入37C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。然后将其复苏培养,次日更换培养液。有实验研究了HDACisMS-275对人胃癌细胞SGC-7901、人胃黏膜正常细胞GES-1和Changliver/人张氏肝细胞的选择性作用及机制,为HDACis的临床应用提供了理论依据。采用不同终浓度MS-275处理SGC-7901细胞、GES-1和Changliver/人张氏肝细胞,用WST-1方法检测药物对细胞的生长抑制作用;AnnexinV、PI双标流式细胞术检测MS-275对肿瘤细胞SGC-7901和正常细胞的选择性杀伤作用;TUNEL染色观察肿瘤细胞核内凋亡情况。结果显示MS-275对胃癌细胞SGC-7901具有明显的生长抑制作用,并且这种作用具有时间及剂量依赖性;MS-275的杀伤作用具有选择性,对正常细胞GES-1和Changliver/人张氏肝细胞并不表现出促凋亡作用;TUNEL染色证明MS-275能诱导SGC-7901细胞核内发生DNA断裂,是细胞发生凋亡的重要指标。
主要参考资料
[1]组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275在体外抑制胃癌细胞的实验研究