背景[1-3]
重组人白细胞介素-6（Recombinant Human Interleukin-6，简称rhIL-6）是一种重要的细胞因子，通过基因重组技术制备而成。它具有广泛的生物活性，能够刺激参与免疫反应的细胞增殖、分化并提高其功能。白细胞介素-6主要由纤维母细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、上皮细胞、角质细胞以及多种瘤细胞产生，并作用于多种细胞。
在生理上，白细胞介素-6的正常水平通常是0.373~0.463ng/L。它能够促进造血干细胞的增殖，刺激活化B细胞增殖以分泌抗体，同时还能够促进血细胞发育。白细胞介素-6的正常值范围一般在2.0万~20万/μL之间，它对于维持免疫系统的平衡和正常功能至关重要。
重组人白细胞介素-6
在临床上，重组人白细胞介素-6被用于治疗多种疾病，如肿瘤和自身免疫性疾病。由于其具有调节免疫应答和炎症反应的能力，它可以作为一种重要的生物治疗药物。然而，如果白细胞介素-6的水平出现异常升高或降低，可能意味着存在某些病理状态。例如，白细胞介素-6的升高可能与病毒感染、细菌感染有关，而降低则可能与再生障碍性贫血等疾病相关。
因此，在使用重组人白细胞介素-6进行治疗时，需要严格控制其剂量和使用方式，并密切监测患者的白细胞介素-6水平。同时，患者也需要在医生的指导下进行治疗，并注意保持良好的生活习惯和饮食，以促进身体的恢复。
应用[4-5]
重组人白细胞介素-6可以用于阻断IL-6/IL-6Rα/STAT3信号通路在猪器官狒狒异种移植模型中的抗炎作用的研究
体内研究tocilizumab抑制IL-6激活IL-6/IL-6Rα/STAT3信号通路的机制;(II)体外研究tocilizumab抑制IL-6激活不同种属细胞的IL-6/IL-6 Rα/STAT3通路的机制;(III)寻找抑制人或猪源性IL-6/人或猪源性IL-6 Rα/STAT3信号通路激活最佳策略;(IV)体外研究IL-6诱导猪内皮细胞的下游相关基因表达的情况及相关抑制剂对IL-6诱导上述基因表达的抑制效果。
方法:1、检测狒狒血清中的狒狒或猪源性IL-6的表达水平:23只接受猪器官移植的狒狒血清(其中14只为猪肾脏异种移植,另9只为猪心脏异种移植),其中16只同时接受tocilizumab处理(其中14只为猪肾脏异种移植,另2只为猪心脏异种移植),另7只未予tocilizumab处理;使用基于流式细胞仪的液相蛋白定量技术(CBA)检测23只狒狒的血清中狒狒源性IL-6的表达水平;使用ELISA检测14只接受猪肾脏异种移植及tocilizumab处理的狒狒的血清中的猪源性IL-6的表达水平。分析狒狒血清中狒狒源性IL-6的表达水平与tocilizumab处理的关系;观察同时接受猪肾脏异种移植及tocilizumab处理的狒狒体内猪源性IL-6的表达水平的变化。
2、接受猪肾异种移植及tocilizumab处理的狒狒的肾移植物(n=10)及肝组织(n=7),阴性对照(正常肾肝组织)及阳性对照(1只接受猪肾异种移植术后发生超急性排斥反应的狒狒的猪肾移植物及肝组织,另一为1只接受移植前免疫抑制诱导治疗时导致严重的毒性反应死亡的狒狒的肾及肝组织),使用免疫组化检测肾移植物和肝组织中IL-6和p-STAT3的表达情况,分析两者在供体猪肾移植物及受体肝组织中的表达与tocilizumab处理的关系。
3、利用不同浓度的重组人白细胞介素-6,不同的时间刺激猪动脉内皮细胞及人动脉内皮细胞,利用流式细胞仪检测p-STAT3的表达,从而确定最佳的IL-6刺激浓度及时间。
4、体外研究tocilizumab抑制IL-6/IL-6 Rα/STAT3信号通路的机制:利用不同浓度的tocilizumab封闭人、狒狒及猪外周血单核细胞的IL-6 Rα,利用流式细胞仪检测IL-6 Rα的表达水平及表达IL-6 Rα的相应细胞亚群,以评估tocilizumab封闭IL-6 Rα的效果及种属特异性;不同浓度的tocilizumab抑制重组人白细胞介素-6(20ng/mL,15min)激活人或猪动脉内皮细胞的STAT3信号通路,利用流式细胞仪检测p-STAT3表达强度,从而评估tocilizumab抑制重组人白细胞介素-6激活人或猪动脉内皮细胞的STAT3信号通路的效果;进一步验证不同浓度的tocilizumab抑制重组人白细胞介素-6(20ng/mL,15min)激活人、狒狒及猪外周血单核细胞的STAT3信号通路,利用流式细胞仪检测p-STAT3的表达,从而评估tocilizumab抑制不同种属免疫细胞中STAT3信号通路的效果。
参考文献
[1]Predictors of response to anti‐IL 6 monoclonal antibody therapy(siltuximab)in idiopathic multicentric Castleman disease:secondary analyses of phase II clinical trial data[J].Deanna E.Morra;;Sheila K.Pierson;;Dustin Shilling;;Sepideh Nemat;;Carlos Appiani;;Mary Guilfoyle;;Craig Tendler;;Frits Rhee;;David C.Fajgenbaum.British Journal of Haematology,2019(2)
[2]Serum amyloid a as an indicator of impending xenograft failure:Experimental studies[J].Guoqiang Zhang;;Hidetaka Hara;;Takayuki Yamamoto;;Qi Li;;Abhijit Jagdale;;Yong Li;;David K.C.Cooper;;Hayato Iwase.International Journal of Surgery,2018
[3]Perspectives on the Optimal Genetically-Engineered pig in 2018 for Initial Clinical Trials of Kidney or Heart Xenotransplantation[J].David K.C.Cooper;;Mohamed Ezzelarab;;Hayato Iwase;;Hidetaka Hara.Transplantation,2018
[4]Adiponectin Enhances Biological Functions of Vascular Endothelial Progenitor Cells Through the mTOR-STAT3 Signaling Pathway[J].Xiaoying Dong;;Xia Yan;;Wei Zhang;;Shengqiu Tang.Physiological Research,2018(4)
[5]张国强.阻断IL-6/IL-6Rα/STAT3信号通路在猪器官狒狒异种移植模型中的抗炎作用的研究[D].南昌大学,2020.